尊龙凯时树突状细胞（dendritic cell，DC）被认为是功能最强的抗原递呈细胞（APC）。单个DC能够激活100-3000个T细胞，其效率是巨噬细胞和B细胞的100-1000倍。DC通过处理肿瘤抗原并向T细胞递呈，能够显著增强初始T细胞的增殖能力，而其他类型的APC（如巨噬细胞和B细胞）则只能刺激已活化或记忆T细胞。

目前，体外培养DC的主要方法是利用细胞因子从骨髓、外周血和脐带血中的DC前体定向诱导。由于骨髓和脐带血取样困难，外周血由于取材简单、无需复杂的筛选和纯化过程，因此成为临床上获取DC的理想选择。

在细胞培养过程中，GM-CSF和IL-4可以促进单核细胞向“巨噬样细胞”的分化，而IL-4则抑制DC前体向CD14+巨噬细胞的转变，促使其分化为CD14-/CD1a-的未成熟DC (iDC)。这种iDC具有较强的抗原摄取和加工能力，但递呈能力较弱，表面中低强度表达MHCⅠ、Ⅱ类分子和B7家族分子（如CD80、CD86），而CD14的表达则为低或无表达。

在DC的成熟过程中，TNF-α和IL-1β能够激活NF-κB信号通路，从而促进DC的成熟（标识为CD1a+/CD83+）。这两种细胞因子协同作用，增强MHCⅡ类分子和共刺激分子的表达。IL-6和PGE2则可激活STAT3信号通路，进一步提高DC的产量、成熟度及其迁移能力，尤其是在免疫激活中发挥了关键作用。在这一阶段，成熟DC的抗原摄取和加工能力明显减弱，但其抗原递呈能力显著增强，可以有效激活T细胞。

在实验中，通过全血采集，利用Ficoll梯度离心法获得人外周血单个核细胞（PBMC），并采用贴壁法或磁珠法富集CD14+单核细胞。贴壁法中，将PBMC以2×10⁶ cells/ml的密度铺板，在37℃下培养1-2小时，使单核细胞贴壁，并通过摇动培养板松动非贴壁细胞。磁珠法则通过CD14+磁珠阳性分选获取高纯度单核细胞。

在培养第3天时，进行半量换液，收集培养基并离心处理，获得未成熟的MoDC。经过五天，细胞会出现部分松动贴壁，七天后其形态会变得更加不规则，且拥有刺状突起，八天后可观察到典型的成熟DC，其悬浮细胞增多且体积变大。

用于分析DC的成熟状态及其功能特征的流式细胞术通常检测多种分子标志，包括CD14、HLA-DR、CD1a/CD83及共刺激分子CD40/80/86等。此外，常见的人DC细胞因子检测还包括IL-12p70、IL-10和IL-1β，以更全面地反映其免疫调节功能。小鼠DC的检测则多集中于IL-6、TNF-α和MCP-1，以评估其炎症反应及趋化能力。

利用混合淋巴细胞反应（MLR）评估DC对T淋巴细胞的激活能力，从而衡量免疫应答强度。尊龙凯时提供科研级和GMP级细胞因子，助力DC的高效、稳定和合规培养，包括GM-CSF、IL-4、TNF-α、IL-6、IL-1β等，这些细胞因子具有高活性、低内毒素及良好的批间一致性，保障DC细胞的生长和扩增。